Retatric Triple G

Struktura i farmakologia receptorowa

Retatric Triple G to syntetyczny 39-aminokwasowy peptyd o potrójnym powinowactwie receptorowym, zaprojektowany jako jednoczesny agonista trzech receptorów klasy B1 GPCR: GLP-1R, GIPR oraz receptora GCGR (trzeciego receptora inkretynowego). Sekwencja bazowa opiera się na natywnym peptydzie GIP(1-42), w którym zastosowano strategiczne modyfikacje umożliwiające aktywację krzyżową wszystkich trzech receptorów. Trzy niekodowane aminokwasy (Aib w pozycjach 2 i 20 oraz alfa-metylo-leucyna w pozycji 13) nadają peptydowi konformację helikalną optymalną do jednoczesnego rozpoznawania przez trzy odrębne domeny ECD receptorów docelowych. Kwas tłuszczowy C20 diacylowy w pozycji Lys20 zapewnia wiązanie z albuminą.

W badaniach wiązania radioligandowego (in vitro) Retatric wykazuje zrównoważone powinowactwo do wszystkich trzech receptorów, z wartościami EC50 w zakresie nanomolarnym. O ile aktywacja samego GLP-1R jest wspólna z monoagonistą Sematic GLP-1, a aktywacja GLP-1R i GIPR z dualnym agonistą Tirzepic GLP-1 + GIP, to dodatkowe powinowactwo do receptora GCGR (GCGR) odróżnia Retatric jako jedyny dostępny triagonistę inkretynowy GLP-1/GIP/GCGR. Masa cząsteczkowa (~4731 Da) jest niższa od masy Tirzepicu (~4813 Da) pomimo analogicznej długości sekwencji (39 aa), co wynika z różnic w modyfikacjach aminokwasowych i lipidowych.

Mechanizm potrójnej aktywacji receptorów

Wszystkie trzy receptory docelowe Retatricu (GLP-1R, GIPR, GCGR) należą do rodziny receptorów sekretynowych (klasa B1 GPCR) i wykorzystują identyczny główny szlak efektorowy: sprzężenie z białkiem Gαs, aktywację cyklazy adenylanowej i wzrost wewnątrzkomórkowego stężenia cAMP. Kluczowa różnica polega na dystrybucji tkankowej trzeciego receptora.

Receptor GCGR ulega dominującej ekspresji w hepatocytach, gdzie pełni centralną rolę w regulacji metabolizmu glikogenu i procesu glukoneogenezy. W mniejszym stopniu GCGR obecny jest również w nerkach, sercu i wybranych strukturach OUN. Aktywacja GCGR przez agonistę prowadzi do szybkiego wzrostu stężenia cAMP w hepatocytach, co uruchamia kaskadę PKA prowadzącą do fosforylacji fosforylazy glikogenu i syntazy glikogenu. W warunkach in vitro na pierwotnych hodowlach hepatocytów szczurzych obserwowano wielokrotny wzrost produkcji cAMP po stymulacji receptora GCGR w porównaniu z poziomem bazalnym.

Potrójny profil aktywacji oznacza, że w eksperymencie obejmującym mieszaninę komórek o zróżnicowanej ekspresji receptorowej, Retatric aktywuje szlak cAMP w komórkach beta trzustki (GLP-1R + GIPR), adipocytach (GIPR), osteoblastach (GIPR), hepatocytach (GCGR), kardiomiocytach (GLP-1R) i neuronach (GLP-1R + GIPR). Ta szeroka aktywacja komórkowa jest unikalną cechą triagonistów w porównaniu z analogami mono- i dualnymi.

Przegląd badań naukowych

Projektowanie monomerycznych triagonistów peptydowych

Finan B i wsp. (2015) ^[1] opisali racjonalny proces projektowania monomerycznego peptydu o potrójnym powinowactwie do receptorów GLP-1R, GIPR i GCGR. W pracy przedstawiono strategię sekwencyjną polegającą na wykorzystaniu szkieletu natywnego GIP jako platformy, do której wprowadzano modyfikacje aminokwasowe umożliwiające aktywację krzyżową dwóch dodatkowych receptorów. Autorzy scharakteryzowali profil wiązania radioligandowego wykazując nanomolarne powinowactwo do wszystkich trzech receptorów docelowych. W testach komórkowych z wykorzystaniem linii HEK293 z nadekspresją poszczególnych receptorów wykazano aktywację kaskady cAMP przez każdy z trzech szlaków Gαs. Praca dostarcza fundamentalnych danych farmakologicznych dotyczących triagonizmu inkretynowego.

Koncepcja dualnego agonizmu inkretynowego

Day JW i wsp. (2009) ^[2] przedstawili pierwszą pracę opisującą racjonalne projektowanie pojedynczego peptydu aktywującego jednocześnie receptory GLP-1R i GIPR. Autorzy zastosowali podejście oparte na sekwencji natywnego GIP, wprowadzając podstawienia aminokwasowe w kluczowych pozycjach odpowiedzialnych za selektywność receptorową. W testach wiązania na izolowanych błonach komórkowych wykazano, że zmodyfikowane peptydy zachowują pełne powinowactwo do GIPR, jednocześnie zyskując aktywność wobec GLP-1R. Praca ustanowiła fundament metodologiczny, na którym oparto późniejsze prace nad triagonistami rozszerzającymi aktywację o receptor GCGR.

Biologia receptora GCGR: trzeci szlak inkretynowy

Authier F i Bhatt Desai R (2008) ^[3] opublikowali szczegółowy przegląd biologii receptora GCGR, obejmujący strukturę receptora, szlak sygnalizacyjny Gαs/cAMP/PKA w hepatocytach oraz mechanizmy internalizacji i recyklingu. Autorzy opisali dominującą ekspresję GCGR w wątrobie oraz jego rolę w regulacji aktywności fosforylazy glikogenu i syntazy glikogenu poprzez fosforylację zależną od PKA. Praca stanowi kluczowe źródło dla zrozumienia farmakologicznego znaczenia włączenia GCGR jako trzeciego celu receptorowego w triagonistach peptydowych.

Porównanie szlaków sygnalizacyjnych trzech receptorów inkretynowych

Brubaker PL i Drucker DJ (2002) ^[4] przedstawili porównawczą analizę szlaków sygnalizacyjnych aktywowanych przez receptory klasy B1 GPCR z rodziny inkretynowej. Praca systematycznie porównuje kinetykę produkcji cAMP, rekrutację beta-arrestyny i desensytyzację receptorów GLP-1R, GIPR i GCGR w odpowiedzi na natywne ligandy. Autorzy wykazali różnice w szybkości internalizacji i recyklingu poszczególnych receptorów, co ma implikacje dla projektowania eksperymentów z wieloreceptorowymi agonistami peptydowymi.

Literatura

1. Finan B, et al. „A rationally designed monomeric peptide triagonist corrects obesity and diabetes in rodents." Nature Medicine. 2015;21:27-36.
2. Day JW, et al. „A new GCGR and GLP-1 co-agonist eliminates obesity in rodents." Nature Chemical Biology. 2009;5(10):749-757.
3. Authier F, Bhatt Desai R. „GCGR receptors." Cell Mol Life Sci. 2008;65(12):1880-1899.
4. Brubaker PL, Drucker DJ. „Minireview: GCGR-like peptides regulate cell proliferation and apoptosis in the pancreas, gut, and central nervous system." Endocrinology. 2004;145(6):2653-2659.

Powiązane materiały badawcze

Szczegółową charakterystykę potrójnego powinowactwa receptorowego GLP-1/GIP/GCGR, dane przedkliniczne i porównanie z mono- i dualnymi agonistami opisujemy w artykule Retatric Triple G — potrójne powinowactwo GLP-1, GIP i GCGR. Do rekonstytucji liofilizatu używaj jałowej wody. Zalecenia dotyczące przechowywania liofilizatów peptydowych znajdziesz w bazie wiedzy.

Przeznaczenie

Produkt jest surowcem chemicznym przeznaczonym wyłącznie do zastosowań badawczych, naukowych i analitycznych in vitro. Nie jest przeznaczony do użytku ludzkiego ani weterynaryjnego, w tym w celach diagnostycznych, terapeutycznych, profilaktycznych lub żywieniowych.

Obchodzenie się z substancją

• Pracuj w warunkach laboratoryjnych zgodnych z zasadami dobrej praktyki laboratoryjnej (GLP).
• Stosuj odpowiednie środki ochrony indywidualnej: rękawice nitrylowe, okulary ochronne, fartuch laboratoryjny.
• Unikaj wdychania pyłu oraz kontaktu ze skórą i błonami śluzowymi.
• Pracuj w dobrze wentylowanym pomieszczeniu.

Klasyfikacja regulacyjna

Produkt nie jest sklasyfikowany jako substancja niebezpieczna zgodnie z rozporządzeniem CLP (WE) nr 1272/2008. Oferowany jest jako odczynnik chemiczny w ramach obowiązujących w Unii Europejskiej przepisów dotyczących substancji chemicznych (REACH, CLP). Nie stanowi produktu leczniczego, suplementu diety, wyrobu medycznego ani kosmetyku w rozumieniu obowiązujących przepisów prawa.

Utylizacja

Substancję niewykorzystaną należy utylizować zgodnie z lokalnymi przepisami dotyczącymi odpadów chemicznych. W warunkach laboratoryjnych: neutralizować i utylizować wraz z odpadami laboratoryjnymi. Nie wylewać do kanalizacji.

Informacje regulacyjne

Produkt oferowany jest zgodnie z obowiązującymi przepisami Unii Europejskiej dotyczącymi substancji chemicznych (REACH, CLP) oraz prawem polskim w zakresie obrotu odczynnikami chemicznymi i materiałami badawczymi. Pełne warunki sprzedaży oraz klasyfikacja produktu zawarte są w Regulaminie Sklepu.

Dokonując zakupu, Klient potwierdza zapoznanie się z powyższymi informacjami oraz akceptuje postanowienia Regulaminu.

Kontakt w sprawach bezpieczeństwa

W przypadku pytań dotyczących obchodzenia się z produktem lub informacji regulacyjnych: [email protected].